蛋白质是生命活动的基本物质，其结构和功能密切相关。蛋白质的一级结构是指其氨基酸的线性排列顺序，它是其他更高级结构（如二级、三级和四级结构）形成的基础。准确解析蛋白质的一级结构对于理解其生物学功能、研究其结构变化、开发生物药物、进行蛋白质工程改造等方面具有重要意义。当前，在生物医药、蛋白质组学、分子生物学等领域，对蛋白质一级结构的表征需求不断上升。

一、质谱法（Mass Spectrometry, MS）

质谱法是当前研究蛋白质一级结构最常用的技术之一。它通过测定离子的质荷比（m/z）来分析分子的质量信息。用于蛋白质一级结构分析时，常结合酶解方法对蛋白质进行切割，然后通过质谱仪检测所得肽段的质量和序列。常见的质谱仪包括电喷雾电离质谱（ESI-MS）和基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）。这些技术能够快速提供肽段的精确质量信息，结合串联质谱（MS/MS）技术，还可以进一步获得肽段的氨基酸序列，从而实现蛋白质一级结构的解析。质谱技术具有灵敏度高、分析速度快、适用于复杂样品的优势，在蛋白质组学、生物标志物筛选、抗体药物开发等领域得到广泛应用。不过，对于特定的蛋白质修饰、异构体的区分或N/C端结构的全面解析仍需结合其他方法。

二、Edman降解法（Edman Degradation）

Edman降解是通过逐步切除多肽链N端的氨基酸，并将每一步生成的衍生物进行鉴定，从而逐步解析氨基酸序列。该方法在短肽或低复杂度蛋白质的序列分析中具有较高的准确性，但其适用范围受到蛋白质长度限制，一般在30-50个氨基酸以内表现最佳。对于较长或存在复杂修饰的蛋白质，Edman降解的应用可能受到一定限制。此外，该方法对样品纯度有较高要求，不适用于混合蛋白样品。尽管Edman降解技术在高通量和复杂样品分析方面不如质谱法，但它仍被用于确认N端序列或验证质谱数据的准确性，尤其在特定的蛋白质表征流程中仍具价值。

三、氨基酸组成分析

氨基酸组成分析是对蛋白质水解后得到的氨基酸进行定量分析的方法，常用于了解蛋白质中各类氨基酸的比例。虽然该方法无法提供完整的氨基酸序列信息，但可用于辅助判断蛋白质的性质、估算分子量、或对已知蛋白质序列进行验证。此方法通常通过酸水解蛋白质样品，然后用高效液相色谱（HPLC）对所得氨基酸进行分离与定量。需要注意的是，在水解过程中，某些氨基酸可能发生降解或改性，从而影响测定结果。该技术主要用于蛋白质结构的初步研究或作为其他表征方法的补充手段，在药物质量控制、生物制品开发等领域亦有应用价值。

四、N端和C端分析

蛋白质的N端和C端结构对于其生物学活性和稳定性具有重要影响。N端和C端分析是一级结构表征的关键组成部分，常用于判断蛋白质是否被正确表达、加工或翻译后修饰。N端分析可通过Edman降解、质谱法或专门的化学衍生技术实现。而C端的结构表征由于其化学特性较弱、易被降解，在技术实现上相对困难，通常依赖高灵敏度的质谱分析和特异性的酶解策略。对N/C端的精确分析在重组蛋白验证、蛋白质表达优化以及免疫原设计等方面有着直接的应用价值。

五、生物信息学工具与数据库辅助

随着蛋白质数据库和生物信息学工具的发展，一级结构表征已不仅依赖实验数据，也越来越多地借助计算分析手段。例如，通过对质谱数据进行比对分析，可在公共数据库中找到匹配的蛋白质序列，从而推断目标蛋白的一级结构。此外，多个序列分析平台支持预测信号肽、跨膜结构域、酶切位点、二级结构趋势等信息，为蛋白质的综合分析提供了便利。这些工具极大提升了一级结构分析的效率与准确性，尤其在高通量研究中发挥着重要作用。

蛋白质一级结构的表征是生命科学研究中的基础工作之一，现有方法有Edman降解法、质谱法、N端和C端分析等，构成了一个多维度、互为补充的技术体系。不同方法各具特点，常根据研究对象的性质、研究目的以及资源条件进行合理选择与组合。对于科研机构和生物制药企业而言，选择专业、可靠的合作平台同样关键。百泰派克生物科技在蛋白质结构鉴定方面拥有丰富的技术经验和完善的技术平台，能够为相关研究与开发提供技术支持和服务保障。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

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