FastKing一步法除基因组cDNA第一链合成预混试剂-产品资讯-资讯-生物在线

FastKing一步法除基因组cDNA第一链合成预混试剂

作者:上海雅吉生物科技有限公司 2021-05-24T09:59 (访问量:3637)

产品简介

本产品是一种高效、稳定、快速并可以去除基因组DNA 污染的反转录预混Mix。5× FastKing-RT SuperMix 中不但含有RTPCR中反转录反应所需的所有试剂,还含有高效去除基因组DNA 的热敏gDNase。FastKing RT Enzyme 是通过分子改造后的新型反转录酶,在通读GC 含量高,二级结构复杂的RNA 模板和抗逆性等方面的表现突出;热敏的gDNase 生效快,效率高,作用时间短,在处理残留基因组DNA 之后不会对cDNA 造成影响。二者结合使用,可使残留基因组的去除与反转录反应同时进行,极大方便了反转录操作。

产品特点

■ 快速:仅需加入模板,18 分钟一步法完成去基因组和高效反转录

■ 高效:修饰了疏水motif,反转效率超过95%

■ 灵敏:低至1 ng 的模板也能被准确识别

■ 简洁:采用热敏DNase,见效快,效率高,时间短,不会对cDNA 产生影响


下游应用

反转录后的cDNA 可用于常规PCR,荧光定量PCR,cDNA 文库构建,

SAGE(基因表达连续分析),引物延伸等多种常规实验。

适用范围

RT-PCR;荧光定量RT-PCR;cDNA文库构建;SAGE(基因表达连续分析);引物延伸。

实验例

实验例 1. 分别使用 TIANGEN KR118、国外 A 公司和国内 B 公司的一步法反转定量试剂合成cDNA,使用 TIANGEN FP209检测小鼠 RN5 基因,展示扩增曲线、熔解曲线和标准曲线。结果显示,TIANGEN KR118 反转录得到的 cDNA 量大,扩增 Ct靠前,特异性高,梯度优秀,特别对于低丰度模板的检测优于其他竞争试剂。

实验例 2. 分别使用 TIANGEN KR118、国外 A 公司和国内 B 公司的一步法反转定量试剂合成 cDNA,使用 TIANGEN FP209 检测人类 HsG 基因,并且人为添加不同浓度的基因组 DNA,检测不同试剂对基因组 DNA 的去除能力。Ct 结果显示,TIANGEN KR118 具有优秀的基因组 DNA 去除能力,多至 500 ng 的基因组 DNA 残留也能有效去除,不会对结果造成影响。ND:未检出。NRT:不做反转录,直接用混合物定量检测。

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